植物材料:種子來自恩施州利川市忠路鎮(zhèn)合心村原生水杉母樹4541號(海拔1153m，地理位置為108°38'53″E，30°07'20″N，85年生，樹高30m，胸徑105．6cm)。于2017年10月份進行采種，千粒重2．47g。采種后種子用密封袋封存放入4℃冰箱冷藏備用(景丹龍等，2011)。

方法采用影響種子萌發(fā)的三個主要條件:溫度、光照、是否浸種作為初始條件，找出水杉種子萌發(fā)的 條件。

浸種首先人工篩選大小一致，相對飽滿的2400粒水杉種子，用75%酒精溶液消毒處理1min后，再用蒸餾水沖洗五遍，用濾紙吸去多余的水分。其中1200粒放在45℃蒸餾水中浸種48h(李會芳等，2006)，使種子充分吸水，然后將種子濾出，剩下1200粒不浸種。1．2．2光照光照條件為模擬自然12h光照/12h黑暗恒溫催芽和24h全黑暗處理催芽。全黑暗處理條件下將裝有水杉種子的培養(yǎng)皿包上錫箔紙并套上多層黑色塑料袋同樣放置在12h光照/12h黑暗恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在綠光等下進行種子觀測。

溫度將以上經(jīng)過浸種和光照處理的種子分別放在溫度為20、25、30℃(此三個溫度梯度的設置是在已有實驗結(jié)果的基礎上進行，研究成果未發(fā)表)的恒溫箱里進行恒溫催芽。總共12個處理，每處理50粒種子，重復4次。為了維持培養(yǎng)皿內(nèi)的水分，之后每隔24h觀察一次，進行萌發(fā)檢測、統(tǒng)計萌發(fā)個數(shù)，并適量添加蒸餾水，保持濾紙濕潤。

不同濃度外源亞硒酸鈉人工篩選大小一致，相對飽滿的1600粒水杉種子。配置濃度分別為0(CK)、0．25、0．5、1．0、2．0、4．0、8．0、16．0mg·L-1的亞硒酸鈉溶液，將水杉種子放在不同濃度的亞硒酸鈉溶液中浸種12h，使種子充分吸水，然后將種子濾出。按試驗設計每個處理選取50粒種子，4個重復。將種子放入事先已放好濾紙的9cm培養(yǎng)皿，加入適當?shù)恼麴s水保持濾紙濕潤，之后每隔24h觀察一次，進行萌發(fā)檢測、統(tǒng)計萌發(fā)個數(shù)，并適量添加蒸餾水，保持濾紙濕潤。

測定指標與計算從種子放進培養(yǎng)箱開始，每隔24h對各培養(yǎng)皿內(nèi)種子發(fā)芽的情況進行觀察記錄，以肉眼看到白色的幼根為標準，判斷種子是否萌發(fā)。每一組保證觀察時差在10min之內(nèi)，共觀察4個星期。通過記錄的數(shù)據(jù)，對每種處理種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)。發(fā)芽率G=發(fā)芽種子數(shù)Ga/供試種子數(shù)Gn×100%;發(fā)芽勢=第7天發(fā)芽種子數(shù)G7/供試種子數(shù)Gn×100%;發(fā)芽指數(shù)GI=∑Gt/Dt，式中Gt為與Dt相對應的每天發(fā)芽種子數(shù)，Dt為發(fā)芽天數(shù)。數(shù)據(jù)處理采用Excel軟件記錄轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)，SPSS18．0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，GraphPadPrism5繪制統(tǒng)計圖。對不同濃度亞硒酸鈉對水杉種子萌發(fā)指標的影響結(jié)果進行方差分析和多重比較(Ducan)，顯著性水平均設定為ɑ=0．05。