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  • 中山杉微體快繁技術研究結論與討論
  • 發(fā)布日期:[2020/08/05]
  • 以優(yōu)良無性系中山杉301莖段為外植體,利用MS或1/2MS培養(yǎng)基研究不同濃度和比例的NAA、6-BA、IBA、KT對中山杉微體快繁的影響,結果表明:以中山杉301帶腋芽幼嫩枝條為外植體可以實現微體快繁。MS培養(yǎng)基中NAA含量較高時可以增加萌芽數量,6-BA含量過高對萌芽有抑制作用;誘導分化培養(yǎng)基配方以MS+NAA0.2mg/L+6-BA0.4mg/L效果 。增殖培養(yǎng)配方以MS+NAA0.3mg/L+6-BA0.4mg/L效果 ,叢芽分化良好,增殖倍數3.8。相同濃度的IBA和NAA以1/2MS生根誘導數量遠遠高于MS培養(yǎng)基,生根誘導配方以1/2MS+IBA0.3mg/L+NAA0.2mg/L效果 ,較相同激素條件下的MS培養(yǎng)基生根率提高8%。

    在組織培養(yǎng)過程中,影響外植體褐變的因素較多,有研究認為取材時間、取材的位置和植物種類對褐變有影響,另外,培養(yǎng)基性質和外植體不親和也能產生褐變。試驗結果表明,只加NAA或6-BA的處理褐變株數均高于二者同時添加的處理,這可能因為激素的濃度及其比例對褐變的產生有影響;另外,木本植物含有較高的酚類化合物,6-BA促進酚類化合物的合成,刺激多酚氧化酶(PPO)活性的提高,切口附近的細胞收到損傷體內酚類物質外溢與PPO發(fā)生反應,也是單一激素處理褐變較高的重要原因之一。NAA濃度在0.1-0.4mg/L范圍內,中山杉外植體誘導芽數量和誘導率均有提升,6-BA濃度由0.6mg/L增加到0.9mg/L時,中山杉外植體誘導芽數量和誘導率大幅下降,說明NAA和6-BA的濃度影響誘導效果。植物快速繁殖過程中常借助繼代培養(yǎng)的方式來獲得叢芽并進行增殖培養(yǎng)。方利娟在6-BA與NAA對雜交松組培增殖效果試驗中得出,6-BA對雜交松不定芽的增殖起決定作用,而NAA有利于提高增殖效率和增殖倍數。本試驗條件下,0.3mg/LNAA和0.4mg/L6-BA的T9處理,叢芽數、增殖倍數遠遠高于其他處理,叢芽生長狀況 ,說明二者組合對中山杉叢芽的繼代增殖起關鍵作用。

    外植體經組織培養(yǎng)會產生大量的嫩芽、新梢,而誘導芽生根關系到能否大量生產和實際應用,所以誘導生根是植物微體繁殖的關鍵環(huán)節(jié)。林景泉研究認為,最適于速生優(yōu)良杉木生根的培養(yǎng)基是1/2MS+蔗糖30/L+IBA1.2mg/L+NAA0.4mg/L。本試驗結果表明,1/2MS培養(yǎng)基+0.3mg/LIBA+0.2mg/LNAA的配方較其他處理有利于中山杉組培苗生根和根系健壯,與前者在核桃上的研究結果存在異同,這是因為試管苗的生根受到包括植物品種、基因型、基本培養(yǎng)基類型和植物生長調節(jié)劑等在內的多重因素的綜合作用。


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