1.1試驗(yàn)材料

試驗(yàn)于2020年4 月在承德市林業(yè)局苗圃進(jìn)行。供試植物為大葉女貞，購(gòu)自世博林業(yè);供試叢枝菌根真菌為摩西球囊霉菌( Glomus mosseae) ，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所提供;供試分析純 NaCl 購(gòu)自北京市通廣精細(xì) 化工有限公司。將大葉女貞幼苗栽植于45 cm × 40 cm( 長(zhǎng) × 寬) 花盆中，每盆定植1 株，栽培基質(zhì)為改良土壤基質(zhì)。緩苗期為1 個(gè)月，其間進(jìn)行正常的水分、養(yǎng)分管理及病蟲(chóng)害防治。 2017 年5 月從定植苗中選取長(zhǎng)勢(shì)、大小一致的大葉女貞苗木進(jìn)行鹽脅迫試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)共設(shè)叢枝菌根真菌和鹽脅迫2 個(gè)因 素，叢枝菌根真菌設(shè) 2 個(gè)水平，分別在定植前接種20 g 叢枝 菌根真菌和20 g 經(jīng)高溫滅菌的叢枝菌根真菌( CK) ; 鹽脅迫 試驗(yàn)共設(shè)6 個(gè)水平，分別將 NaCl 濃度設(shè)置為 0、3、6、9、12、15 mg/g。試驗(yàn)設(shè)叢枝菌根真菌( 處理與對(duì)照) × NaCl 濃度( 6 水 平) 共12 個(gè)處理，每個(gè)處理重復(fù)10 盆，共120 盆，隨機(jī)區(qū)組設(shè) 計(jì)。為避免鹽沖擊效應(yīng)， NaCl 濃度每天按 3 mg/g 梯度遞增， 直至達(dá)到各處理預(yù)定濃度，然后每隔3 d 按預(yù)定鹽濃度澆灌1 次，澆灌量為300 mL。

1.2.2 項(xiàng)目測(cè)定及方法 鹽脅迫處理 60 d 后，對(duì)大葉女貞 進(jìn)行各數(shù)據(jù)指標(biāo)測(cè)定。根系菌根侵染率測(cè)定采用 Phillips 等 的方法，菌根侵染率 = 侵染菌根段數(shù)/檢測(cè)菌根段數(shù) × 100%;生物量主要測(cè)定大葉女貞的株高、莖粗、地徑和總干質(zhì) 量;采用相對(duì)電導(dǎo)法( relative conductance，簡(jiǎn)稱(chēng) ＲC) 測(cè)定葉片 細(xì)胞膜透性; MDA 含量測(cè)定采用硫代巴比妥酸比色法; 分別 采用抑制硝基四氮唑藍(lán)( nitrotetrazolium blue chloride，簡(jiǎn)稱(chēng) NBT) 光還原比色法、愈創(chuàng)木酚法和紫外分光光度法對(duì) SOD、 POD 和 CAT 活性進(jìn)行測(cè)定; Pro 含量測(cè)定采用磺基水楊酸提 取法和可溶性糖( SS) 含量測(cè)定采用蒽酮比色法; 可溶性蛋白 ( SP) 含量采用考馬斯亮藍(lán) G－250 法進(jìn)行測(cè)定。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析 采用 Excel 2010 軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)整理、 計(jì)算及作圖，差異顯著性分析采用 SPSS 18.0 進(jìn)行。